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染色

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TRAP染色液

货号:G1050

品牌:Servicebio

价格:¥350

规格: 50片

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  产品简介:

  TRAP是酸性磷酸酶(ACP)同功酶6种同工酶(0-5)中的第5型,破骨细胞(OC)含量最为丰富,通常作为鉴别OC的重要标志。TRAP染色结果显示OC胞浆阳性,呈酒红色,核呈阴性。

  包装内容:

产品货号 产品名称 规格
G1050-1 TRAP染液A醋酸缓冲液 18ml
G1050-2 TRAP染液B六偶氮副品红溶液 500μl
G1050-3 TRAP染液C亚硝酸钠溶液 500μl
G1050-4 TRAP染液D萘酚AS-BI磷酸酯 20mg
G1050-5 TRAP染液E N,N-二甲基甲酰胺 1ml
G1050-6 TRAP染液F酒石酸钾钠 0.282g

  保存条件:

  整套试剂4℃避光保存,有效期12个月。

  工作液的配制:

  1.将TRAP染液B与TRAP染液C等比例混合,现配现用。

  2.将TRAP染液D 20mg用TRAP染液E 1ml溶解,备用。

  3.孵育液配制:TRAP染液A 18m加入以上两种溶液各1ml混匀,再加TRAP染液F,充分溶解过滤后备用即为TRAP孵育液。

  使用方法:

  1.石蜡切片脱蜡至水,纯水洗数分钟。

  2.孵育液37℃恒温箱孵育50~90min。

  3.自来水冲洗2~5min。

  4.苏木素复染核1~2min,盐酸酒精分化,氨水返蓝。

  5.常规脱水,透明,中性树胶封片。

  细胞爬片染色步骤:

  1.细胞固定:吸除孔板里培养液,用蒸馏水洗2遍,吸除蒸馏水,将固定液加入孔板中固定15-30min,蒸馏水洗3遍。

  2.细胞破膜:吸除蒸馏水,将破膜液加入孔板中破膜30min,蒸馏水轻洗3遍;

  3.孵育染色:滴加孵育液于孔板中,置于37℃孵育1-2h,蒸馏水洗3遍。

  4.苏木素染色:滴加苏木素染液染3-5min,蒸馏水洗,分化液分化,蒸馏水洗,返蓝液返蓝,蒸馏水洗。

  5.吸除蒸馏水,滴加无水乙醇稍脱水,取出孔板中的盖玻片,吹风机吹干,中性树胶封片。

  染色结果:

  酸性磷酸酶活性处呈酒红色,胞核呈蓝色。

  注意事项:

  1.本产品适用于EDTA脱钙后的骨组织。酸性脱钙液对骨组织中酶活性破坏较大,不适合使用本染液染。

  2.切片经孵育液孵育前一定要用纯水洗。

  图例:

 


图一:骨组织EDTA脱钙后染TRAP,破骨细胞红色。



图二:牙周骨EDTA脱钙后染TRAP,破骨细胞红色。