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染色

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真菌和基底膜染色试剂盒

货号:G1059

品牌:Servicebio

规格: 50ml*4+2ml+40ml+24ml

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  产品简介:

  六胺银染色法对于观察肾小球系膜、基底膜的各种形态改变具有极重要的诊断价值,特别是对于观察膜性肾病基底膜的钉突形成、淀粉样变性肾病基底膜的双轨和多轨改变等是其他特殊染色所不可替代的,同时也对各种真菌染色都敏感,存在少量真菌时也容易发现。本染液染色原理是将切片经GDS氧化,肾组织基膜内的多糖和肺组织中的真菌内的多糖化合物被氧化暴露出醛基,游离的醛基还原六铵银的银离子成金属银而呈黑色。硫代硫酸钠对已显色的银盐起固定作用,并除去未反应的银离子。

  包装内容:

产品货号 产品名称 规格
G1059-1 六胺银(PASM)染液A 50ml
G1059-2 六胺银(PASM)染液B 50ml
G1059-3 六胺银(PASM)染液C 2ml
G1059-4 六胺银(PASM)染液D 40ml
G1059-5 六胺银(PASM)染液E 24ml
G1059-6 六胺银(PASM)染液F 50ml
G1059-7 六胺银(PASM)染液G 50ml

  保存条件:

  常温保存,有效期6个月。

  使用方法:

  1.石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。

  2.切片入六胺银(PASM)染液A浸泡过夜,水稍洗。

  3.切片入六胺银(PASM)染液B染色15-20min,蒸馏水快速浸洗3-5次,切片晾干。

  4.工作液配制:将六胺银(PASM)染液C:六胺银(PASM)染液D=1:20混合成六胺银储备液(现配现用),取六胺银储备液20ml,加入蒸馏水15ml,再加入六胺银(PASM)染液E 2ml,混合均匀,即为工作液。

  5.孵育染色:工作液提前置于60℃烤箱预热,滴加预热好的工作液于组织切片上,加盖孵育(53℃-57℃);

  6.显色:孵育40min后将切片拿出在镜下观察(观察时工作液不用洗去),肾脏以肾小球毛细血管基膜呈黑色为准,如果着色不够深,则继续放入烤箱孵育。以后每隔10min取出切片在镜下观察,直至染色结果满意为止,蒸馏水洗3遍。

  7.六胺银(PASM)染液F稍处理,蒸馏水洗1遍。

  8.复染(根据需要选做):85%、95%的酒精梯度脱水,切片入六胺银(PASM)染液G染色20s。

  9.脱水封片:切片依次放入无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-无水乙醇Ⅲ5min-二甲苯Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。

  10.显微镜镜检,图像采集分析。

  染色结果:

  肾小球囊基膜、肾毛细血管球基膜和肾小管上皮基膜呈黑色,真菌、胶原纤维也呈灰黑色或棕黑色,背景红色。

  注意事项:

  1.在孵育之前切片必须用蒸馏水清洗干净,配制六胺银储备液和工作液的容器必须洗干净,否则易出现杂质。

  2.六铵银储备液和工作液必须现配现用;

  3.在低倍镜检时,菌体不宜着色太黑,否则在高倍镜下观察则不够清皙透亮,在菌体密集成堆的地方显色更要适当;

  4.肾基膜比真菌等较难显色,因而在温箱中作用的时间也较长;肾小管基膜一般比肾毛细血管球基膜显色早,但应以后者作为标准,肾毛细血管球基膜呈黑色而背景呈淡棕黄色为宜。

  5.染色最好用滴染法好控制染色程度,如果用浸染法所有与试剂接触的玻璃缸必须用蒸馏水清洗干净,而且玻片在显影液中及易出现银镜反应使整个玻片变黑很脏影响美观并且不易控制显色程度。

  图例:

  肾小管基膜和肾毛细血管球基膜均呈黑色,背景浅红。

  肺组织中真菌呈黑色,背景浅红色。